繡球菌菌種制作和其他食用菌一樣，包括母種、原種、栽培種三級(jí)，今日主要介紹一下母種的制備技術(shù)。
母種是指經(jīng)規(guī)范方法選育后而獲得的、具有結(jié)性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，以玻璃試管為培養(yǎng)容器和使用單位，通常又稱為一級(jí)種或者試管種。
關(guān)于繡球菌原始母種的來(lái)源，在有條件的地方可從子實(shí)體上自行提取，但是由于制作過(guò)程要求嚴(yán)謹(jǐn)難度較高，所以一般的生產(chǎn)單位都是從國(guó)家認(rèn)可研究單位購(gòu)買而來(lái)的。買回后直接進(jìn)行母種的擴(kuò)繁就可以。首先，我們先來(lái)看一下母種培養(yǎng)基的制作。
母種培養(yǎng)基制作。制作母種培養(yǎng)基時(shí)所采用的配方為：復(fù)合糖蛋白30克，蛋白1克，大豆粉1克，KH2PO4(磷酸二氫鉀)1克，瓊脂粉20克，水1000毫升。
上面的料都準(zhǔn)備好以后就可以制作了，將準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基配方依次倒入鍋內(nèi)，瓊脂粉先不要放入，邊加熱邊攪拌，等沸騰后再加入瓊脂粉，并不斷攪拌，直到瓊脂粉完全融化，然后再將煮好的培養(yǎng)基倒入塑料杯內(nèi)，這時(shí)需要注意的是，如果體積不足1000毫升還要加水。
試管分裝。整理好以后，要趁熱將培養(yǎng)基倒入固定在鐵架臺(tái)上的漏斗內(nèi)，用量筒量取10毫升的蒸餾水，倒入一支空試管內(nèi)，做分裝試管的對(duì)照。將漏斗軟管下的玻璃管插入試管口約3厘米深處，用右手捏緊橡膠軟管的止水夾，使培養(yǎng)基緩緩流入空試管內(nèi)，直到液面與蒸餾水的液面持平為止，然后，松開(kāi)止水夾讓培養(yǎng)基停止流入，并將試管下移離開(kāi)軟管。
接下來(lái)，依次重復(fù)，直到將培養(yǎng)基全部分裝到試管內(nèi)，分裝試管時(shí)需要注意的是，動(dòng)作要迅速連貫，以防止培養(yǎng)基在漏斗內(nèi)凝固。分裝完成后，每支試管都要用硅膠塞住，接下來(lái)還要將試管進(jìn)行扎捆。
試管包扎。一般情況下，每7支試管作為一扎，先用橡皮筋將試管下端扎緊，再用牛皮紙將試管口處進(jìn)行包裹，并用橡皮筋進(jìn)行困扎。下面就要進(jìn)行滅菌的工作了。
培養(yǎng)基滅菌。將包扎好的培養(yǎng)基試管垂直放入滅菌框內(nèi)，再將菌框放入滅菌鍋內(nèi)，在120攝氏度的高溫下進(jìn)行滅菌30分鐘。待滅菌鍋溫度降至60攝氏度左右時(shí)，要及時(shí)取出試管，并將它們擺放成斜面。
擺放斜面。斜面的長(zhǎng)度以試管長(zhǎng)度的1/2-2/3為好，當(dāng)試管內(nèi)培養(yǎng)基完全凝固后才可以將試管收起，制作好的母種培養(yǎng)基應(yīng)放置在陰涼、通風(fēng)、干燥處保存，留作備用。上面的工作都完成以后，還要進(jìn)行母種的接種工作。
轉(zhuǎn)管過(guò)程。母種接種是將菌種接入試管斜面的過(guò)程。在完全無(wú)菌的接種箱、接種室或超凈工作臺(tái)上進(jìn)行。
首先，將制備好的母種培養(yǎng)基，待轉(zhuǎn)母種，酒精燈，打火機(jī)，接種鉤，酒精棉球等放到超凈工作臺(tái)上，打開(kāi)紫外燈在低速通風(fēng)的環(huán)境下滅菌30分鐘，然后關(guān)閉紫外燈，并將風(fēng)速調(diào)節(jié)為中速，通風(fēng)5分鐘后再打開(kāi)日光燈接種時(shí)，先點(diǎn)燃酒精燈，用酒精棉球?qū)㈦p手進(jìn)行擦拭消毒，消毒完成后，用左手握住母種和斜面培養(yǎng)基試管各一支，注意，斜面要向上，同時(shí)還要使它們處水平的位置。
右手拿住接種鉤，在火焰外焰上反復(fù)灼燒，直到接種鉤最前端變?yōu)榧t色為止。接下來(lái)，拔掉兩個(gè)試管的膠塞，將灼燒過(guò)的接種鉤伸入母種試管內(nèi)，將母種表層菌絲連同培養(yǎng)基挖取少許，送入待接試管內(nèi)斜面的中間部位，抽出接種鉤后，要灼燒管口，后再塞上膠塞。當(dāng)所有的試管全部轉(zhuǎn)接完成后，就可以進(jìn)行培養(yǎng)了。
首先，要將試管重新捆扎，并記錄好接種時(shí)間，將接種后的試管放入25攝氏度的恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)15天左右菌絲即可長(zhǎng)滿。
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