為規(guī)范接種操作，提高接種成活率，特制定此細則，本細則適用于接種室接種操作人員，菌種室及相關(guān)人員參照執(zhí)行。
1、接種室接種操作人員應有強的無菌操作意識，任何不規(guī)范或無意識的操作及行為都有可能給接種帶來污染隱患，因此所有接種室操作及行為都應以此細則為標準執(zhí)行，細則之外的操作及行為經(jīng)咨詢主管人員并經(jīng)同意后方可用于接種作業(yè)，同時我們將根據(jù)實際情況對本細則進行補充和完善。
2、接種室、緩沖間的消毒
接種室為高度無菌區(qū)，每天接種前2.5～3小時時段必須對接種室進行較為嚴格的消毒處理,消毒之前所有接種所需物件、菌種等必須一次性準備到位。
2.1菌種消毒
挑選好的菌種在接種室開始消毒之前應對菌袋表面進行藥浴消毒，消毒所用藥品為0.1%高錳酸鉀溶液,消毒時將菌袋浸入溶液中,并用抹布進行擦拭,袋壁、袋頸、袋口及棉塞等凡暴露于空氣中的部位都應擦到，將擦洗完畢的菌種馬上放到接種室即可以進行接種室的空間消毒作業(yè)。
2.2 接種室消毒方法
接種室消毒時臭氧機開機時間為2小時，同時點3大包菇保一號輔助消毒；緩沖間點5小包菇保一號進行熏蒸。接種室消毒開始時間為每天早上的5:00～5:15，下午為11:15～11:30,接種時間上午不晚于8:10，下午不晚于14:10。臭氧機關(guān)機時間將由時控開關(guān)自動控制，消毒人員不再進入緩種間手動關(guān)閉。
3、接種前準備
接種室、緩種間均采用統(tǒng)進統(tǒng)出方式，嚴禁分批及無序進出，進入前所有操作人員必須將個人事情處理好，一旦進入直至接種完畢中途不得出入，進入緩種間后必須更換工作服、戴工作帽、穿專用鞋，換好后蘸取消毒液將雙手洗凈，然后同時進入接種室開始接種作業(yè)，進入緩沖間和接種室均應注意隨手把門關(guān)好不留空隙。
4、接種操作
進入接種間先用75%酒精把手、接種鏟、剪刀及工作臺面、墊板擦拭一遍并將接種鏟、剪刀在酒精燈火焰上進行灼燒，然后可進行以下操作。
4.1 將菌種袋棉花塞、套環(huán)拔掉用灼燒后的接種鏟將料上表面0.5cm左右的菌種刨掉棄之不用，所棄之菌種集中剩放于小桶內(nèi)，做好后將菌袋倒置，并將袋口上折放于塑料筐內(nèi)，注意袋口的密封，菌種不可暴露于空氣中。
4.2 碎化 碎化操作推薦用完一袋處理一袋，也可以一次性將所有菌種碎化，但需注意碎化后的菌種必須密封好。碎化時可采用揉搓等手法，但注意不要弄破袋壁或揉搓過度造成菌絲損傷嚴重，影響后續(xù)發(fā)菌。菌種碎化粒度要求其直徑不大于0.5cm。
4.3 每接完一袋菌種，接種鏟必須重新在火焰上進行灼燒一次，特別是接觸菌種的部位，灼燒時間應不短于20秒，并有相應的冷卻時間，防止接種鏟過熱燙死菌種。
4.4 在菌種使用過程中，袋內(nèi)菌種少不利挑取時，可用灼燒后的剪刀將菌袋上部剪掉，不可將剩余菌種倒入下一袋。菌種若生有菇芽，應將菇芽挑出棄除。
4.5 接種中若發(fā)現(xiàn)菌種被污染，應立即將染菌菌種袋口擰緊放于小桶內(nèi)，并重新對手及接種鏟進行消毒。
4.6 接種時菌包上的棉花塞要用右手小指和手掌夾住，不可放在操作臺上，每個菌包接入三小鏟菌種，接種時應一手扶菌包頸部，一手用接種鏟挑取菌種接入，菌種應均勻鋪滿菌包的整個料面，并有不少于一鏟的菌種落入接種孔中，接好后將棉花塞在酒精燈火焰上過一遍后塞入菌包。
4.7 接種時若發(fā)現(xiàn)水包或菌袋破損現(xiàn)象，應挑出不接；若發(fā)現(xiàn)菌包正常但棉花塞打濕的，應在接入菌種后，更換預先滅好菌的新棉塞。
5、清潔工作
5.1 每次接種完畢后均應清理垃圾及接種工具、臺面、墊板、小桶、凳子等物件，其上不得留有料屑殘渣等物，并用抹布蘸取2%來蘇兒溶液擦拭一遍。
5.2 地面料屑先用掃帚打掃干凈，特別是角落及軌道槽。打掃干凈后再用2%濃度的漂白粉或來蘇兒溶液拖洗地面，洗凈后將明水收干即可。地面拖洗在每天下午接種完畢后進行，上午不進行拖洗，但要將料屑等垃圾清掃干凈。
6、注意事項
6.1 接種室、緩沖間均為無菌區(qū)，消毒期間至操作完畢其門不可隨意打開，工作人員進出必須統(tǒng)一行動，不可把緩沖間當休息室、聊天室。
6.2 進入接種室嚴禁接打手機、聽MP3、大聲聊天等做與工作無關(guān)的事情，手機在進入接種室前一律關(guān)機。
6.3 接種室地面必須每天拖洗，墻面每天應擦拭一次。
6.4 接種鏟應保持干凈、光滑，不允許綁扎纖維質(zhì)或雜菌易棲息的膠布等物。
6.5 接種室消毒人員在消毒前應在菌袋之間插入溫度計，接種人員進入接種室后由組長負責查看料溫，若料溫高于25℃應停止接種。
6.6 工作服、鞋、帽每星期至少洗滌一次，保持干凈整潔。每天接種完畢鞋底的料渣必須刮除干凈。
6.7 接種室電器設備要定期進行維護保養(yǎng)，電子凈化機過濾網(wǎng)及電場每月必須清洗一次，臭氧機過濾海綿每月更換一次，并每天觀察電器運行狀態(tài)，如有故障及時進行修理和更換。并定期進行空間無菌度的檢測，確保生產(chǎn)平穩(wěn)進行。
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